蔗糖、乳糖和麦芽糖等。二糖是由两个单糖分子通过“糖苷键”连接在一起形成的分子相对大一些的糖，二糖在人体内必须分解为单糖后才能被吸收利用。天然存在的游离态和具有机能的糖类以哺乳类的乳糖、细菌和昆虫血液等的海藻糖、植物的蔗糖为代表。这些是作为各种生物体的能量来源，或者作为生物体组成的物质原料，承担着所必需的糖类的贮藏或运输的重要作用。一方面分别可由各种特异的转葡萄糖苷酶的作用以对应的糖核苷所合成，同时也可由特异性强的分解酶水解和磷酸分解。纤维二糖和麦芽糖也是较为熟知的二糖。另一方面，与其说是单独合成而发挥其机能的不如说是纤维素和淀粉的酶促分解的产物。因此比天然发现的二糖存有更高级的结构，而游离的二糖大多是其代谢分解的产物。
蔗糖：在甘蔗、甜菜中含量很高。白糖、红糖、砂糖中也都主要是蔗糖。
麦芽糖：在谷类种子萌发的芽中含量较多，尤其以麦芽中含量最高。
乳糖：主要存在于奶与奶制品中，甜味只有蔗糖的1/6。