代谢物酶法测定的速率法与终点法有何区别
代谢物酶法测定的速率法与终点法的却别如下:速率法又称连续检测法,是指在多个时间点连续监测产物(或底物)在线性范围内的生成量(或消耗量)即零级反应速率测定酶活性的方法。定时法是固定时间法的简称,是指测定反应开始后一段时间内(t1~t2)产物的生成量或底物的消耗量以测定的方法。两种方法都是生物化学检验的方法,都需要比色。【摘要】
代谢物酶法测定的速率法与终点法有何区别【提问】
代谢物酶法测定的速率法与终点法的却别如下:速率法又称连续检测法,是指在多个时间点连续监测产物(或底物)在线性范围内的生成量(或消耗量)即零级反应速率测定酶活性的方法。定时法是固定时间法的简称,是指测定反应开始后一段时间内(t1~t2)产物的生成量或底物的消耗量以测定的方法。两种方法都是生物化学检验的方法,都需要比色。【回答】
酶活力测定速率法又称
连续监测法速率法a通常用在酶活性测定时,反应曲线上肯定有成线性的区域,而两点速率法又称固定时间法或一级动力学法,利用的是一级反应,在仪器上的区别主要是前者会有一个检测线性区线性度,利用最小二乘法拟合直线,计算速率;而两点速率法没有线性度检测,直接用吸光度差除以时间计算。 固定时间法又被称为一级动力学法(first order kinetic)、初速率法(initial rate)、二点动力学法(two point rate)等。在一定的反应时间内,反应速度与底物(被测物)浓度的一次方成正比,由于底物(被测物)在不断的消耗,因此整个反应速度在不断的减小,表现为吸光度的增加(或降低)速度越来越小,这类反应达到平衡的时间很长。理论上可以在任意时间段进行监测,但由于血清成份复杂,反应刚启动时反应较复杂,杂反应较多,经过一段延迟时间才能进入稳定反应期,必需在特定时间段内进行监测。通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法,称为两点法,其中t1往往取反应开始的时间。在酶反应一定时间后,往往通过加入强酸、强碱、蛋白沉淀剂等,使反应完全停止,所以也叫中止反应法。