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化学发光法原理

时间:2024-11-25 23:36:40 编辑:阿旭

在化学上,什么是“电化学发光法”?

电化学发光免疫测定(ECLI)是一种在电极表面由电化学引发的特异性发光反应,包括电化学和化学发光两个部分。分析中应用的标
记物为电化学发光的底物三联吡啶钌或其衍生物N-羟基琥珀酰胺(NHS)酯,可通过化学反应与抗体或不同化学结构抗原分子结合,
制成标记的抗体或抗原。ECLI的测定模式与ELISA相似。其基本原理是发光底物二价的三联吡啶钌及反应参与物三丙胺在电极表
面失去电子而被氧化。氧化的三丙胺失去一个H+而成为强还原剂,将氧化型的三价钌还原为激发的二价钌,随即释放光子而恢复为基态
的发光底物。这一过程在电极表面周而复始地进行,不断地发出光子而常保持底物浓度的恒定。
具有以下优点:1.标记物的再循环利用,使发光时间更长、强度更高、易于测定;2.敏感度高,可达pg/ml或pmol水平;3
.线性范围宽,>10的四次方;4.反应时间短,20min以内可完成测定;5.试剂稳定性好,2~5℃可保持一年以上。


相比常规化学发光法,电致化学发光法有什么特点,为什么

相比常规化学发光法,电致化学发光法的特点如下:化学发光法是分子发光光谱分析法中的一类,它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。电化学发光分析法具有灵敏度高、仪器设备简单、操作方便、易于实现自动化等特点,广泛地应用于生物、医学、药学、临床、环境、食品、免疫和核酸杂交分析和工业分析等领域。在21世纪中必将继续为解决人类面临的各种重大问题发挥更加显著的作用。化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发光 (光辐射) 所吸收的能量来源不同。体系产生化学发光,必须具有一个产生可检信号的光辐射反应和一个可一次提供导致发光现象足够能量的单独反应步骤的化学反应。

化学发光法是检测什么的?

化学发光法是检测待测物含量痕量的。化学发光是物质在化学反应过程中,其物质分子吸收化学能产生光的辐射现象,如:REK-20N型化学发光定氮仪是兴化睿科采用化学发光检测原理,待测样品被引入到高温裂解炉后,在1050℃左右的高温下,样品被完全气化并发生氧化裂解,其中的氮化物定量地转化为一氧化氮(NO)。相关条件:任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤,即化学激发和发光。因此,一个化学反应要成为发光反应,必须满足两个条件:第一、反应必须提供足够的能量(170 ~ 300KJ / mol)。第二、这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态,并且有足够的荧光量子产率。所研究的化学发光反应大多为氧化还原反应,且多为液相化学发光反应。以上内容参考:百度百科—化学发光法

化学发光法是检测什么的?

化学发光法是检测待测物含量的。它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理,利用仪器对体系化学发光强度的检测,而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光法在痕量金属离子、各类无机化合物、有机化合物分析及生物领域都有广泛的应用。化学发光应用化学发光Western杂交检测,是同位素检测的一种高度灵敏的替代方法。酶标记抗体取代了放射性标记抗体,当它作用于底物时,可产生光信号。多数特异抗原检测方法以辣根过氧化物酶(HRP))碱性磷酸酶(AP)二级抗体耦联物为基础。信号可通过感光胶片或专yong的成像设备来采集。化学发光底物用于印迹技术已有十几年的历史,目前大部分实验室做转印时都会采用化学发光技术进行检测。随着冷CCD化学发光检测技术的发展,现在越来越多的实验室都开始采用冷CCD的凝胶成像系统进行化学发光的检测,胶片成像虽然比自然发光法灵敏度更高,但也有很多缺点:耗时,需要暗房,显影剂和胶片,胶片较贵且为需持续购买的消耗品。同时由于胶片的线性范围较窄,因此用胶片上的条带(特别是表达量较低的条带)进行定量几乎不可能。冷CCD技术与X胶片相比具有瞬时影像处理、高灵敏度和高分辨率、动力范围广等优点。以上内容参考:百度百科-化学发光法